蛋白质是生物体内进行生命活动的基本物质之一。但在复杂的生物体系中，蛋白质往往会与其它分子混合在一起，难以纯化。如何高效地分离出单一的蛋白质成为了蛋白质研究中很重要的一步，下面我们就来详细了解一下蛋白质纯化的全过程。

步骤一：破细胞和提取蛋白

首先要对细胞进行破裂，让细胞内的蛋白质释放出来。静置、搅拌和超声波破碎都可以实现细胞破裂。随后，用缓冲液将蛋白质提取出来。

步骤二：固液分离和预处理

在获得含蛋白质的提取物后，通过离心分离出上清液和沉淀。上清液含有蛋白，并进行预处理，如调节pH值、添加盐类、添加螯合剂等。

步骤三：分离技术的选择

根据蛋白的特性，选择合适的分离技术。比如，根据蛋白的大小、电荷、亲疏水性来选择凝胶过滤、离子交换或亲和层析等技术。

步骤四：分离纯化

根据蛋白的分离特点进行分离纯化，常用的纯化技术有：离子交换色谱、凝胶过滤色谱、逆流法柱层析、亲和层析、逆相层析等技术。

步骤五：浓缩和纯化度的检测

在分离纯化后，需要对样品进行浓缩和检测纯化度。常用的浓缩技术有透析、盐析、氨基酸含量测定，纯化度检测则可以用SDS-PAGE或Westernblotting方法来进行。

步骤六：蛋白质制备和保存

最后获得纯化的蛋白后，需要对其进行保存。常见的蛋白保存方式有低温保存、加甘油保存和速冻保存。